凝膠過濾色譜中的瓊脂糖凝膠
更新時間:2022-01-20 點擊次數(shù):2624
基于凝膠過濾色譜的原理,對其介質(zhì)的最基本的要求是不能與原料組分發(fā)生除排阻之外的任何其他相互作用,如電荷作用、化學作用、生物學作用等。理想的凝膠過濾介質(zhì)具有高物理強度及化學穩(wěn)定性,能夠耐受高溫高壓和強酸強堿,具有高化學惰性,內(nèi)孔徑分布范圍窄,珠粒狀顆粒大小均一度高。目前常用的有葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等。
瓊脂糖凝膠來源于一種海藻多糖瓊脂,是一種天然凝膠,不是共價交聯(lián),所以氫鍵交聯(lián)的鍵能比較弱。它與葡聚糖不同,孔隙度是以改變瓊脂糖濃度而達到的。瓊脂糖凝膠的化學穩(wěn)定性不如葡聚糖凝膠。瓊脂糖凝膠沒有干膠,必須在溶脹狀態(tài)保存,除丙酮和乙醇外,瓊脂糖凝膠遇脫水劑、冷凍劑和一些有機溶劑即被破壞。用瓊脂糖凝膠進行分離操作的適宜工作條件是pH4.5-9、溫度0-40℃。瓊脂糖凝膠對硼酸鹽有吸附作用,不能用硼酸緩沖液。
瓊脂糖凝膠顆粒的強度很低,操作時必須十分小心。另外,由于瓊脂糖顆粒彈性小,柱高引起的壓力能導致變形,造成流速降低甚至堵塞,所以裝柱時應(yīng)設(shè)法對柱壓進行調(diào)整。瓊脂糖凝膠沒有帶電基團,所以對蛋白類物質(zhì)的非特異性吸附力明顯小于葡聚糖凝膠。在介質(zhì)離子濃度>0.1mol/L時已不存在明顯吸附。
瓊脂糖凝膠的特征是能分離幾萬至幾千萬高分子量的物質(zhì),分離范圍隨著凝膠濃度上升而下降,顆粒強度卻隨濃度上升而提高,特別適用于核酸類、多糖類和蛋白類物質(zhì)的分離,彌補了聚丙烯酰胺凝膠和葡聚糖凝膠的不足,擴大了應(yīng)用范圍。
月旭科技瓊脂糖凝膠的名稱為Tanrose,以下介紹一下Tanrose Fast Flow系列產(chǎn)品。
Tanrose 4FF和Tanrose 6FF分別為4%和6%的瓊脂糖經(jīng)過乳化、漂洗、分篩而成的凝膠過濾介質(zhì),該介質(zhì)具有良好的物理和化學穩(wěn)定性,該介質(zhì)既可采用氫氧化鈉滅菌,也可以高壓蒸汽滅菌。用于多糖、核酸、病毒、超螺旋DNA及大分子復合物的分離純化或者檢測。