玩轉免疫親和小柱
更新時間:2022-09-05 點擊次數(shù):966
霉菌毒素是由霉菌產生的有毒代謝產物,有較強的致癌性和降低免疫力作用。常見的霉菌毒素主要有黃曲霉毒素、赭曲霉毒素,嘔吐毒素、單端孢霉烯(T-2毒素)、玉米赤霉烯酮、串珠鐮刀菌素、伏馬菌毒素等。糧食及飼料很容易受到霉菌毒素的污染,這一問題越來越成為現(xiàn)代農業(yè)生產中不可忽視的重大難題。
月旭科技利用其強大的科研力量和先進的生產工藝開發(fā)出了一系列霉菌毒素免疫親和柱產品,該系列產品通過了多次科學實驗的檢驗,得到了多個guan方檢測機構的認證,并廣泛適用于各檢測實驗室、進出口機構等。
一般一支完整的免疫親和柱由6部分組成:
• 柱管(1mL/3mL)
• 固定相(瓊脂糖凝膠)
• 抗體(瓊脂偶聯(lián)特異性抗體)
• 保護液(通常是緩沖溶液保持瓊脂潤濕)
• 篩板以及上下頂蓋(防止柱液流失)
免疫親和柱技術即免疫親和層析技術,屬于樣品前處理過程中一種簡化樣品提取過程,有效提高樣品純度的凈化技術,由于其特異性強在食品分析中屬于痕量檢測,檢測限非常低。Welchom®免疫親和柱用于從樣品中分離、純化真菌毒素,基于抗原與抗體之間的特異性反應。免疫親和柱中的抗體通過共價鍵作用懸浮在凝膠中,特異性吸附樣品中的真菌毒素。如果供檢測的樣品中含有真菌毒素,樣品通過免疫親和柱時,毒素被抗體捕捉結合。所有其他物質,被從免疫親和柱中清洗出去。甲醇作為洗脫液,將真菌毒素將抗體上洗脫。
使用前先將親和柱恢復至室溫,放掉柱子的保護液,然后進行上樣、淋洗、洗脫過程。
1)上柱的樣品溶液應該保持酸堿中性、無懸浮物、甲醇濃度不宜過高;
2)樣品為復雜樣品時(如高蛋白、高油脂、酸性樣品),可將提取液分兩次提取樣品,提高提取效果;
3)樣品過柱及甲醇洗脫速度要慢且均勻,約每秒1-2滴;
4)抗原抗體發(fā)生反應的最佳溫度是在25℃左右,實驗需要的環(huán)境溫度最好是室溫24℃-28℃,太高或太低的溫度都會對親和柱的回收率有一定的影響。親和柱在使用前需要恢復至室溫再進行實驗;
5)親和柱不要在無水狀態(tài)下,瓊脂容易干燥wei縮,影響親和柱的質量;
6)親和柱儲存條件為4℃-8℃。切記0℃以下的低溫,因為緩沖液凍結,會嚴重影響親和柱內的物理結構,對親和柱的質量影響很大;
7)洗脫一般選擇試劑甲醇,為增強洗脫效果可加大甲醇體積;
8)樣液免疫親和柱凈化后,洗脫液過0.45μm或更小孔徑濾膜效果更好。